Profilage précis des miARN : Un adaptateur unique et une stratégie de circularisation réduisent le biais de ligature et augmentent la détection des miARN.
Détection directe : Génère des bibliothèques de petits ARN sans qu'il soit nécessaire d'enrichir les petits ARN.
Sans gel : Élimine les dimères d'adaptateur à partir de n'importe quelle entrée sans excision prolongée du gel.
DESCRIPTION
Le kit de librairie Zymo-Seq™ miRNA est un kit innovant de préparation de librairies de séquençage de petits ARN qui utilise un adaptateur unique et une stratégie de circularisation pour réduire le biais de ligature et fournir un profilage précis des petits ARN à partir d'ARN acellulaire (cfRNA) et d'ARN total. Ce flux de travail simple et rationalisé minimise le temps de manipulation et utilise l'élimination sans gel des dimères d'adaptateur pour générer des bibliothèques de petits ARN brins à partir de plasma, de biofluides, de cellules, de tissus, etc.
Pour préparer les librairies de miARN Zymo-Seq™, l'ARN est ligaturé à l'adaptateur de miARN unique et le produit ligaturé est circularisé. L'excès d'adaptateur est bloqué et éliminé à l'aide de billes magnétiques spécialisées qui permettent un flux de travail entièrement sans gel pour un apport aussi faible que 1 ng. Le produit miRNA-adaptateur circularisé est ensuite transcrit en sens inverse. L'ADNc résultant est amplifié à l'aide d'amorces PCR d'indexation qui ajoutent un adaptateur compatible avec Illumina et des séquences à double index unique (UDI) pour un multiplexage rentable. Tout ce qui est nécessaire pour créer des librairies prêtes pour le séquençage, y compris les amorces d'indexation et les billes SPRI, est inclus dans le kit. C'est l'ARN-Seq en toute simplicité.
Caractéristiques techniques
Composants supplémentaires requis (non fournis) - Éthanol pur de qualité biologie moléculaire (> 95 %)
Entrée maximale - 200 ng d'ARN total, ou ARN extrait de 200 µl de plasma ou de sérum.
Quantité minimale - 1 ng d'ARN total, ou ARN extrait de 50 µl de plasma ou de sérum.
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