Réactif enzyme GspSSD

ADN polymérasepour l'amplification isothermekit LAMP

Le mastermix original d'OptiGene pour l'amplification isotherme - il suffit d'ajouter la matrice et les amorces. Contient la nouvelle ADN polymérase GspSSD LF, propriété d'OptiGene. Vitesse d'amplification supérieure. Convient à l'amplification isotherme rapide de l'ADN. L'activité native de la transcriptase inverse permet une RT-LAMP à enzyme unique. Une cible d'ADN (VKORC1) a été amplifiée à partir d'ADNg humain (Sigma). des réactions LAMP de 25μl ont été réalisées à 65ºC pendant 60 minutes sur un thermocycleur en temps réel (Roche LC-480) en double exemplaire. Le "Time to result" est défini comme le moment où la valeur de fluorescence de l'amplification atteint un seuil de 10 % de la fluorescence maximale. Les mélanges maîtres isothermes d'OptiGene (ISO-001 et ISO-004) ont été comparés au kit WarmStart LAMP de NEB (ADN et ARN) [Lot:0021609]. ISO-001 et ISO-004 ne contiennent pas d'enzyme spécifique de transcriptase inverse (RT). Pour une véritable comparaison avec le mélange NEB (qui contient une enzyme reverse-transcriptase séparée et spécifique), 0,5U AMV-RT a été ajouté aux réactions OptiGene Master Mix (ISO-001 inc. RT et ISO-004 inc. RT). Les réactions RT-LAMP standard ISO-001 et ISO-004 ont également été comparées pour montrer l'excellente activité reverse-transcriptase inhérente du mélange. Une cible ARN (Beta-actine) a été amplifiée à partir d'ARN total humain (Ambion). des réactions RT-LAMP de 25μl ont été réalisées à 65ºC pendant 60 minutes sur un thermocycleur en temps réel (Roche LC-480) en double exemplaire. Le "Time to result" est défini comme le moment où la valeur de fluorescence de l'amplification atteint un seuil de 10 % de la fluorescence maximale.