La plupart des méthodes actuellement utilisées pour la détermination quantitative de la bilirubine sont basées sur la réaction entre la bilirubine et l'acide sulfanilique diazoté. Dans le soluté seulement la bilirubine directe de bilirubine (conjuguée) réagira de cette manière. D'autre part, afin d'estimer la bilirubine totale la bilirubine non-conjuguée doit être libérée de l'attachement à l'albumine et a rendu soluble dans l'eau. En méthode de Malloy-Evelyn le méthanol est employé tandis que la caféine/benzoate de sodium est employée dans la méthode de Jendrassik-Grof.
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