Les kits qPCR Vitassay sont des tests PCR en temps réel prêts à l'emploi, conçus pour amplifier et détecter les pathogènes.
Les kits Vitassay qPCR contiennent dans chaque puits des enzymes, du tampon, des amorces et des sondes ainsi qu'un contrôle interne dans un format lyophilisé.
Les kits comprennent un contrôle positif et un contrôle négatif.
L'identification de l'ADN ou de l'ARN des pathogènes se fait par l'utilisation d'amorces spécifiques à la cible et de sondes d'hydrolyse marquées par fluorescence qui hybrident des régions conservées dans les génomes des différents pathogènes
Kit PCR en temps réel pour la détection qualitative et la différenciation des virus Influenza
A (Flu A) et B (Flu B) dans des échantillons humains.
Principe du test
Le test Vitassay qPCR Flu A + Flu B est basé sur l'amplification en temps réel de fragments spécifiques et conservés du gène M1 du virus de la grippe A et de la grippe B
de fragments conservés du gène M1 des virus de la grippe A et de la grippe B. L'ARN viral
viral extrait est transcrit en ADNc à l'aide d'une amorce spécifique par une étape de transcription inverse
suivie immédiatement dans le même puits par une réaction en chaîne de la polymérase. La présence du virus
est détectée par une augmentation de la fluorescence observée au cours de la réaction lors de l'hydrolyse de la sonde fluorescente
de la sonde fluorescente.
Le test est basé sur l'activité de l'exonucléase 5' qui utilise deux amorces et une sonde d'hydrolyse fluorogène pour détecter l'accumulation de la séquence cible amplifiée
fluorogène pour détecter l'accumulation de la séquence cible amplifiée au cours de la réaction PCR
. Lorsque la polymérase commence à étendre les amorces, la sonde est hydrolysée par son exonucléase 5'-3'
par son activité exonucléasique 5'-3', ce qui entraîne la séparation spatiale du fluorophore et de l'atténuateur
quencher.
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