Kit de réactifs en solution CellAmp™ Whole

pour la recherchepour PCRpour acides nucléiques

Le kit d'amplification du transcriptome entier CellAmp (temps réel), Ver. 2, vous permet de passer des cellules à l'ADNc prêt à être analysé par PCR en temps réel. Lors de l'utilisation de techniques conventionnelles pour travailler avec des quantités infimes d'acides nucléiques, la perte de produit lors des étapes de purification est un problème fréquent. Cependant, ce kit cellules-ADN garantit un bon rendement du produit car les étapes de purification de l'ARN et de l'ADNc, qui entraînent des pertes, ne sont pas nécessaires. La procédure commence par la lyse des cellules, suivie d'une réaction de transcription inverse avec l'amorce adaptatrice dT (amorce RT dT 2) pour synthétiser l'ADNc à partir de l'ARNm. Ensuite, la désoxynucléotidyl transférase terminale (TdT) est utilisée pour ajouter une queue dA à l'ADNc synthétisé. Le produit ADNc 3' contenant une queue dA qui en résulte est utilisé comme matrice directe pour la PCR, ce qui permet de réduire le nombre de cycles d'amplification nécessaires. Outre le passage des cellules à l'ADNc, ce produit peut être utilisé pour amplifier l'ADNc à partir de traces d'ARN. Le kit CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 utilise une étape supplémentaire de traitement à l'exonucléase I, qui permet de supprimer l'amplification non spécifique dérivée de l'amorce et d'augmenter les rendements des gènes faiblement exprimés Le kit d'amplification du transcriptome entier CellAmp (Real Time) Ver. 2 permet l'amplification directe de l'ADNc à partir d'un petit nombre de cellules. L'ADNc amplifié peut être utilisé comme modèle pour la PCR en temps réel. Lorsque l'on utilise des techniques conventionnelles pour travailler avec des quantités infimes d'acides nucléiques, la perte d'acides nucléiques au cours des étapes de purification est un problème fréquent. Cependant, ce kit offre un bon rendement car les étapes de purification de l'ARN et de l'ADNc, qui entraînent des pertes, ne sont pas nécessaires.