Les mesures des niveaux d'expression de l'ARNm - que ce soit par analyse de Nord, protection par ribonucléase ou PCR quantitative en temps réel - sont généralement normalisées en comparant les données à celles obtenues pour un gène de référence interne ou endogène. Les gènes de référence tels que la bêta-actine et la glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase (GAPDH) sont le plus souvent utilisés parce que leurs niveaux d'expression sont censés rester constants dans différentes conditions de traitement. Malheureusement, cette hypothèse n'est pas toujours valable et les résultats basés sur les seuls gènes de ménage peuvent être biaisés (Suzuki, Higgins et Crawford 2000). Une meilleure méthode consiste à normaliser vos données à l'aide de notre ADNc de référence humain qPCR, le seul ADNc de contrôle entièrement dérivé de tissus humains.
l'ADNc humain de référence qPCR est le contrôle idéal pour comparer les données de différentes expériences de PCR quantitative (qPCR). Parce qu'il est préparé à partir d'un pool d'ARN total prélevé sur plusieurs tissus différents, notre ADNc de référence humain qPCR offre une large couverture génique, comme le montre l'analyse par microarray du matériel de départ ARN. L'ARN, et donc l'ADNc, préparé à partir de tissus entiers offre une meilleure représentation des gènes avec moins de variations que l'ARN fabriqué à partir de lignées cellulaires (données non présentées). De plus, l'analyse PCR montre que notre ARN total est pratiquement exempt d'ADN génomique. Cela permet une mesure plus précise du nombre de copies de transcriptions. Les gènes à haute et à basse abondance sont bien représentés, ce qui permet de préparer une large gamme de standards dilués en série pour chaque essai qPCR. La variation d'un lot à l'autre de l'ADNc de référence est minime car la source d'ARN est préparée à l'échelle industrielle.
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