Version chimiquement modifiée de l'ADN polymérase Taq thermostable FIREPol®. Cette enzyme n'est activée que par une pré-incubation à 95°C, ce qui empêche toute activité non spécifique de la polymérase à des températures plus basses pendant la préparation de la réaction.
spécificité et sensibilité accrues
réduction de la formation de dimères d'amorces
préparation de la réaction et expédition sans glace
HOT FIREPol® est une ADN polymérase FIREPol® chimiquement modifiée.
HOT FIREPol® est inactive à température ambiante et est activée par une étape d'incubation de 15 minutes à 95°C. Cela permet de démarrer la PCR à chaud et de minimiser les erreurs d'amorçage et d'extension dues à des amorces recuites de manière non spécifique et à des amorces-dimères. Recommandé pour les applications de routine (fragment jusqu'à 5 kb).
Possède une activité 5′→3′ polymérase et 5′→3′ exonucléase, ainsi qu'une activité de transférase terminale non dépendante du modèle, mais ne possède pas d'activité 3′→5′ exonucléase (relecture), ce qui rend le produit généré approprié pour le clonage TA.
La fidélité de HOT FIREPol® est similaire à celle d'une Taq ADN polymérase ordinaire (taux d'erreur par nucléotide d'environ 2,5 x10-5).
Propriétés
Concentration : 5 U/µl
Démarrage à chaud : oui, activé par une étape d'incubation de 15 minutes à 95°C
Le taux d'erreur par nucléotide et par cycle est d'env. 2.5 x 10-5
La précision est d'environ 4 x 104
La demi-vie estimée à 95ºC est de 1,5 heure.
Stockage et tampon de dilution : 50 % de glycérol (v/v), 20 mM Tris-HCl pH
Source : Purifié à partir d'une souche d'E.coli porteuse d'un plasmide surproducteur contenant un gène modifié de l'ADN polymérase de Thermus aquaticus.
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