Le dUTP ultra-pur (2'-Désoxyuridine, 5'-Triphosphate) est fourni sous forme de sel de sodium dans de l'eau purifiée (pH 8,5). Le dUTP peut être utilisé à la place du dTTP dans les protocoles de PCR et de RT-PCR afin d'éviter la rémanence d'amplifications antérieures. La substitution du dUTP au dTTP dans la PCR permet d'obtenir des produits PCR contenant de l'uracile qui conviennent à la plupart des applications standard. L'enzyme uracil-N-glycosylase (UNG, également appelée UDG) peut être ajoutée à un prémélange PCR pour exciser l'uracile de tout produit PCR contaminant, évitant ainsi les faux positifs. Chaque lot de dUTP est testé pour garantir une amplification spécifique de l'ADN et l'absence d'activité nucléasique.
Caractéristiques
Idéal pour l'amplification PCR et la synthèse d'ADNc
Exempt de nucléase et de ribonucléase
Applications
Éviter la contamination entre PCR afin d'éliminer une source de faux positifs.
Note de préparation
Solution de travail : Nous recommandons de préparer un mélange de désoxynucléotides contenant du dATP, du dCTP, du dGTP (10 mM, chacun), du dUTP (20 mM) ; (par exemple, pour la préparation de 100 μl de mélange de nucléotides, ajouter 10 μl de dATP, de dCTP, de dGTP (chacun) et 20 μl de dUTP à 50 μl d'eau, de qualité PCR).
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