Mesurée par sa capacité à hydrolyser le groupe 5'-phosphate du substrat adénosine-5'-monophosphate (AMP). Le produit orthophosphate est mesuré à l'aide d'un kit de détection du phosphate au vert de malachite. L'activité spécifique est >12 500 pmol/min/μg, mesurée dans les conditions décrites.
Séquence N-terminale
Analyse - Trp27
Masse moléculaire prédite - 85 kDa
SDS-PAGE - 84-93 kDa dans des conditions réductrices.
Sans porteur
Que signifie CF ?
CF est l'abréviation de Carrier Free (CF). Nous ajoutons généralement de l'albumine sérique bovine (BSA) comme protéine porteuse à nos protéines recombinantes. L'ajout d'une protéine porteuse améliore la stabilité de la protéine, augmente la durée de conservation et permet de stocker la protéine recombinante à une concentration plus diluée. La version sans support ne contient pas de BSA.
Quelle formulation me convient le mieux ?
En général, nous conseillons d'acheter la protéine recombinante avec BSA pour une utilisation en culture cellulaire ou tissulaire, ou comme standard ELISA. En revanche, la protéine sans support est recommandée pour les applications dans lesquelles la présence de BSA pourrait interférer.
Procédure de dosage
Matériaux
Tampon d'essai : 25 mM Tris, 5 mM MgCl2, pH 7,5
Chimère 5'-Nucléotidase/CD73 Fc humaine recombinante (rhCD73/mFc)
Substrat : Adénosine monophosphate (AMP), stock de 5 mM dans de l'eau désionisée
Kit de détection du phosphate par le vert malachite
plaque transparente à 96 puits
Lecteur de plaque avec capacité de lecture de l'absorbance
Préparer une courbe standard à partir de l'étalon de phosphate 1 M en ajoutant 10 µl de l'étalon de phosphate 1 M à 990 µl de tampon de dosage pour un stock de 10 mM. Continuer en ajoutant 10 µl du stock de phosphate 10 mM à 990 µl de tampon de dosage pour un stock de 100 µm (il s'agit de la première dilution à utiliser comme étalon).
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