Le dosage rapide implique un protocole simple d'ajout de deux réactifs
Le substrat réagit directement avec le H2O2 ; il n'est pas nécessaire d'utiliser la HRP comme enzyme de couplage
Vue d'ensemble
Le test ROS-Glo™ H₂O₂ est un test bioluminescent homogène, rapide et sensible qui mesure le niveau de peroxyde d'hydrogène (H₂O₂), une espèce réactive de l'oxygène (ROS), directement dans la culture cellulaire ou dans des réactions enzymatiques définies. Un substrat de luciférine dérivatisé est incubé avec l'échantillon et réagit directement avec H₂O₂ pour générer un précurseur de luciférine. L'ajout de la solution de détection ROS-Glo™ convertit le précurseur en luciférine et fournit la luciférase recombinante Ultra-Glo™ pour produire un signal lumineux proportionnel au niveau de H₂O₂ présent dans l'échantillon.
Le substrat H₂O₂ réagit directement avec H₂O₂ pour créer le précurseur de la luciférine. La solution de détection du substrat ROS-Glo™ convertit le précurseur de la luciférine en luciférine et fournit également la luciférase Ultra-Glo™ pour produire de la lumière. Le signal lumineux est proportionnel à la quantité de H₂O₂ dans le puits d'échantillon.
Aperçu du protocole d'essai ROS-Glo™ H₂O₂ pour la détection cellulaire ou biochimique
Le test suit un protocole simple d'ajout de deux réactifs qui ne nécessite pas de manipulation de l'échantillon. Le substrat ROS-Glo™ H₂O₂ peut être ajouté aux puits d'essai avec le traitement ou à la fin de la période d'incubation du traitement, et les données peuvent être enregistrées moins de 2 heures après l'ajout du réactif.
Réalisation d'essais enzymatiques ou cellulaires dans des plaques de 96 et 384 puits
Le traitement des cellules K562 par la ménadione a entraîné une augmentation des ROS dépendante de la concentration, détectée par le test ROS-Glo™ H₂O₂.
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