Dosage des caspases à haute sensibilité - nécessite moins de cellules et moins d'enzymes
Protocole simple d'ajout-mélange-mesure - pas de préparation d'échantillon
Facilement extensible à des formats de plaques de 96, 384 et 1 536 puits
Essai homogène mesurant l'activité de la caspase-3/7
Le test Caspase-Glo® 3/7 contient un substrat DEVD-aminoluciférine proluminescent pour la caspase-3/7 et une luciférase thermostable brevetée dans un réactif optimisé pour l'activité de la caspase-3/7, l'activité de la luciférase et la lyse cellulaire. L'ajout du seul réactif Caspase-Glo® 3/7 dans un format "ajout-mélange-mesure" entraîne la lyse cellulaire, suivie du clivage du substrat par la caspase. Cela libère de l'aminoluciférine libre, qui est consommée par la luciférase, générant un signal luminescent de type "glow" qui est proportionnel à l'activité de la caspase 3/7.
La luciférase stabilisée et le système de tampon propriétaire améliorent les performances de l'essai dans une large gamme de conditions d'essai, et l'essai est moins susceptible d'être affecté par l'interférence de composés que les essais basés sur la fluorescence ou la colorimétrie. Le dosage de l'activité des caspases est conçu pour être utilisé sur des plaques multipuits avec de l'enzyme purifiée ou des cellules en culture et peut être multiplexé avec d'autres dosages cellulaires. Sa grande sensibilité permet d'utiliser le test Caspase-Glo® 3/7 dans les systèmes de culture cellulaire 3D. Le test fournit d'excellentes valeurs de facteur Z dans les modèles cellulaires et enzymatiques purifiés.
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