Linéaire sur huit ordres de grandeur ou plus de la concentration enzymatique.
Sensible à 10-20 moles de luciférase.
Essai simple et non homogène pour quantifier l'activité de la luciférase Firefly
Le système de dosage de la luciférase est un réactif extrêmement sensible et rapide pour la quantification de la luciférase de luciole. Des résultats linéaires sont observés sur au moins huit ordres de grandeur de la concentration de l'enzyme, et moins de 10 à 20 moles de luciférase peuvent être mesurées dans des conditions optimales. En général, il est possible d'obtenir une sensibilité 100 fois supérieure à celle du dosage de la chloramphénicol acétyltransférase (CAT).
Le réactif de dosage de la luciférase génère une lumière presque constante pendant au moins une minute, de sorte que le dosage est compatible avec la mesure de la luciférase à l'aide d'un luminomètre à tube unique ou d'un luminomètre à plaques multipuits équipé d'un auto-injecteur. Il est préférable d'utiliser un luminomètre, mais ce n'est pas nécessaire, car l'essai est adaptable aux compteurs à scintillation.
Réactifs de lyse cellulaire utilisés avec le système de dosage de la luciférase
Le système de dosage de la luciférase est un dosage non homogène ; les cellules contenant la luciférase doivent être lysées avant l'ajout des réactifs. Le tampon de lyse Glo, le réactif de lyse de culture cellulaire, le tampon de lyse passive et le tampon de lyse de rapporteur peuvent être utilisés avec le système de dosage de la luciférase pour la quantification des rapporteurs dans les cellules de mammifères. Le tampon de lyse rapporteur permet d'effectuer des dosages de la luciférase, de la CAT et de la β-galactosidase à partir du même extrait cellulaire. Le système de dosage de la luciférase peut également être utilisé pour la quantification des cellules végétales et bactériennes, mais seul le réactif de lyse de culture cellulaire est adapté à ces applications.
Dans certains kits, le tampon de lyse est inclus, dans d'autres, il doit être acheté séparément
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