Kit de réactifs en solution E.Z.N.A.®

pour PCRpour acides nucléiquesde bactéries

Isolement de l'ADN plasmidique à faible taux d'endotoxine (<1EU/µg) à partir de cultures bactériennes allant jusqu'à 5 ml à l'aide de mini-colonnes d'essorage Vue d'ensemble Les plasmides isolés par les procédures de purification traditionnelles contiennent normalement des niveaux élevés d'endotoxines (également connues sous le nom de lipopolysaccharides ou LPS) qui peuvent interférer de manière significative avec les expériences de transfection en aval. Il est possible d'utiliser jusqu'à 5 ml de cultures nocturnes pour les plasmides à nombre de copies élevé et 10 ml pour les plasmides à faible nombre de copies. Le E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I intègre une étape efficace d'élimination des endotoxines dans la procédure de purification des plasmides afin de produire des plasmides de qualité transfection (<0,1 EU/µg) pour une transfection efficace. Les cellules bactériennes sont lysées en utilisant la méthode de lyse alcaline-SDS. Le lysat cellulaire nettoyé est ensuite traité avec le réactif ETR pour éliminer efficacement les endotoxines. Après avoir ajusté les conditions de liaison, le lysat cellulaire est appliqué dans la colonne HiBind® DNA et l'ADN purifié est élué de la membrane de la colonne. Rapide - 30 minutes ou moins Sûr - Pas d'extractions au phénol/chloroforme Polyvalent - Formats à centrifugation et sous vide disponibles Haute qualité - Réduction efficace des endotoxines (<0,1 EU/µg) Spécifications CARACTÉRISTIQUES - SPÉCIFICATIONS Application en aval - Transfection sensible de lignées cellulaires ; thérapie génique, etc. Matériel de départ - 1-5 ml de culture LB avec OD600 entre 2 et 3 ; ou équivalent Type de plasmide - ADN de haute copie, de basse copie, cosmide Mode de traitement - manuel, centrifugation Rendement - 1 - 24 Technologie de fixation de l'ADN - Mini-colonne d'essorage en silice Méthode de nettoyage du lysat - Centrifugation Temps de traitement - <30 minutes Rendement - 15-25 µg pour un nombre élevé de copies ; 0,1-5 µg pour un faible nombre de copies Autres - Inclut l'étape d'élimination de l'endotoxine