Isolez jusqu'à 200 µg d'ADN plasmidique de qualité transfection et à faible endotoxine (<1EU/µg) à partir de cultures bactériennes de 15 à 50 ml en utilisant des filtres à seringue pour l'élimination des lysats et des colonnes d'essorage midi
Vue d'ensemble
Le kit Midi E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid constitue une méthode efficace pour l'isolement à grande échelle d'ADN plasmidique à faible teneur en endotoxines. Le système utilise des seringues filtrantes de nettoyage du lysat au lieu de la centrifugation pour nettoyer rapidement les lysats bactériens après la lyse alcaline. Après la purification du lysat, les endotoxines sont éliminées et le protocole suit une procédure simple "bind-wash-elute" pour fournir de l'ADN plasmidique de haute qualité. Les rendements varient en fonction du nombre de copies de plasmides, de la souche d'E. coli et des conditions de croissance. 15 à 50 ml de cultures bactériennes en milieu LB produisent généralement jusqu'à 200 µg d'ADN plasmidique à nombre de copies élevé. Pour les plasmides à faible nombre de copies, il est possible de traiter jusqu'à 100 ml de culture. Le système utilise la centrifugation ou la technologie du vide pour la purification des plasmides et élimine les colonnes à écoulement par gravité qui prennent du temps et qui nécessitent une précipitation à l'alcool. L'ADN plasmidique purifié convient aux applications sensibles en aval, telles que la transfection de cellules de mammifères, le clonage, le séquençage automatisé de l'ADN fluorescent (les lectures typiques dépassent 800 pb), le séquençage de nouvelle génération, la digestion par enzymes de restriction, la ligature, la PCR, la transcription in vitro, la transformation, etc.
Rapide - Purification de l'ADN plasmidique en < 45 min
Sûr - Pas d'extractions au phénol/chloroforme
Polyvalent - Formats à centrifuger et sous vide disponibles
Haute qualité - ADN plasmidique de qualité transfection, à faible endotoxine (< 1 UE/µg)
Spécifications
Ne pas utiliser dans les procédures de diagnostic.
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