Le kit de mutagenèse NZYSupreme est conçu pour réaliser des mutations ponctuelles et supprimer ou insérer un ou plusieurs nucléotides dans une séquence d'ADN. Le système nécessite la fourniture de deux amorces oligonucléotidiques synthétiques contenant la mutation souhaitée.
Détails
Le kit de mutagenèse NZYSupreme fournit une méthode simple et très efficace pour générer des mutations ponctuelles ou pour supprimer/insérer un ou plusieurs nucléotides dans n'importe quel type d'ADN plasmidique à l'aide de la PCR. Ce kit de mutagenèse a été récemment développé pour réduire le temps de travail et augmenter l'efficacité de l'édition de l'ADN. Le système nécessite la fourniture de deux amorces oligonucléotidiques synthétiques partiellement complémentaires contenant la mutation souhaitée. L'incorporation de ces amorces oligonucléotidiques mutées avec l'ADN polymérase Supreme NZYProof, une polymérase de haute précision, génère un plasmide muté contenant des entailles en quinconce, qui résiste à la digestion Dpn I (car l'ADN synthétique n'est pas méthylé). Après traitement à la Dpn I, le plasmide muté obtenu est récupéré par transformation de cellules compétentes NZYStar. Pour une présentation schématique du protocole de mutagenèse, voir la figure 1. L'ADN isolé à partir de souches dam- Escherichia coli, y compris JM101 et SCS110, n'est pas une matrice appropriée pour la réaction de mutagenèse.
Composants
- Mélange maître Supreme NZYProof 2x incolore
- Dpn I (10 U/µL)
- Plasmide de contrôle
- Mélange d'amorces pour le contrôle de la mutagenèse
- Cellules compétentes Plasmide de contrôle (0,1 ng/µL) (*)
(*) uniquement fourni dans le kit MB44702
Plus d'informations
Conditions d'expédition
Glace sèche
Application
Mutagenèse dirigée
Caractéristiques
Mutagenèse de plasmides <15 kb ; Rapide
Catégorie de produit
Clonage et mutagenèse de l'ADN
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