Le kit de synthèse d'ADNc premier brin NZY, oligos séparés, est un système qui comprend tous les composants nécessaires à la synthèse d'ADNc premier brin. Le kit permet de réagir à des températures élevées, ce qui est avantageux lorsque l'on part d'un ARN difficile et complexe.
Détails
Le kit de synthèse d'ADNc premier brin NZY, oligos séparés, est un système qui comprend tous les composants nécessaires à la synthèse d'ADNc premier brin, à l'exception de l'ARN matrice. Les hexamères aléatoires et les amorces Oligo(dT)18 sont fournis dans des tubes séparés afin de faciliter le choix de l'amorce appropriée pour initier votre réaction de transcription inverse. L'ADNc simple brin obtenu peut être utilisé pour la PCR quantitative en temps réel par transcription inverse (RT-qPCR). Le kit de synthèse d'ADNc First-Strand NZY, oligos séparés, est formulé pour fournir des rendements élevés de produits d'ADNc de pleine longueur et pour augmenter la sensibilité de la RT-qPCR. Le matériel de départ peut aller de 10 pg à 5 µg d'ARN total. Outre les hexamères aléatoires et les amorces Oligo(dT)18, le kit comprend le NZYRT 2× Master Mix, sans oligos, qui contient des dNTP, du MgCl2 et un tampon RT optimisé ; le 10× Annealing Buffer et le NZYRT Enzyme Mix. Le mélange enzymatique NZYRT comprend à la fois la transcriptase inverse NZY (RNase H moins) et l'inhibiteur de ribonucléase NZY afin de protéger l'ARN contre la dégradation due à la contamination par la ribonucléase. La RNase H (de E. coli) est fournie dans un tube séparé pour dégrader spécifiquement le modèle d'ARN G604 dans les hybrides ADNc-ARNc après la synthèse de l'ADNc premier brin. Cette procédure améliorera la sensibilité des réactions RT-qPCR ultérieures puisque les amorces PCR se lieront plus facilement à l'ADNc.
Composants
- Mélange enzymatique NZYRT
- NZYRT 2x Master Mix, sans oligos
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