Ce kit FluoroSpot peut être configuré de nombreuses façons - conçu pour le profilage des cellules B.
Utilisation prévue
Ce kit FluoroSpot Flex est destiné au dénombrement des cellules B sécrétant des IgM, IgG et IgA de souris à l'aide du test FluoroSpot. Les cellules B sécrétant des anticorps spécifiques d'un antigène ainsi que les cellules B sécrétant des anticorps indépendamment de la spécificité de l'antigène peuvent être mesurées à l'aide de ce kit. Réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans les procédures de diagnostic.
Pour l'analyse des cellules B mémoires, il peut être nécessaire de préactiver les cellules avec du R848 et de l'IL-2 recombinant de souris (tous deux inclus).
Performances
Images d'IgM, IgG et IgA de souris provenant de l'analyse de splénocytes activés in vivo de souris BALB/c hyperimmunisées (avec de l'ovalbumine) dans IgM/IgG/IgA FluoroSpot. 75 000 cellules/puits ont été incubées dans la plaque FluoroSpot pendant 5 heures sans stimulation.
Description de l'analyte -
L'immunoglobuline M (IgM) est le premier isotype d'anticorps (également appelé classe) sécrété par le système immunitaire adaptatif en réponse à un antigène étranger. Les cellules B plasmatiques sécrètent l'IgM principalement sous forme de pentamères, c'est-à-dire cinq molécules d'IgM reliées entre elles par la chaîne J. Étant donné que les IgM sont formées au début de la réponse immunitaire et qu'elles sont ensuite remplacées par des IgG, les anticorps spécifiques de la classe IgM sont caractéristiques d'une infection récente, en cours ou chronique. Par conséquent, l'IgM représente l'isotype ayant la plus faible affinité pour les antigènes. En raison de sa structure, avec 10 sites de liaison à l'antigène par pentamère d'IgM, elle peut néanmoins lier des antigènes liés à la surface avec une très grande avidité. L'immunoglobuline M représente environ 10 % de la concentration totale d'immunoglobulines dans le sérum.
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