Ouvre la voie à l'analyse fonctionnelle d'une question de recherche spécifique.
Utilisation prévue
Ce kit FluoroSpot Path est destiné au dénombrement des cellules sécrétant de l'IFN-γ et de l'IL-2 humains en réponse à des peptides tuberculeux à l'aide du test FluoroSpot. Réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans les procédures de diagnostic.
Composition du pool de peptides
Les pools de balayage sont constitués de peptides synthétiques de 15 mers se chevauchant sur 11 acides aminés, couvrant les protéines complètes. Le pool de balayage ESAT-6 est dérivé de la protéine cible antigénique sécrétoire précoce et contient 21 peptides. Le pool de lecture CFP-10 est dérivé de la protéine du filtrat de culture et contient 23 peptides. Enfin, le pool de balayage EspC est dérivé de la protéine associée à la sécrétion ESX-1 et contient 23 peptides.
Performances
Des PBMC humains (250 000 cellules/puits) provenant d'un individu atteint de tuberculose latente ont été incubés pendant une nuit en l'absence ou en présence des pools d'analyse ESAT-6 et CFP-10 (Mabtech). Le nombre de cellules sécrétant de l'IFN-γ et/ou de l'IL-2 a été analysé par FluoroSpot. Les cellules sécrétant une seule cytokine ainsi que les cellules sécrétant deux cytokines ont été déterminées. Le Spot Center a été utilisé pour identifier les spots des cellules doublement sécrétrices, visualisés dans une image superposée de LED490, FITC (IFN-γ) et LED550,Cy3 (IL-2). L'analyse des spots a été réalisée avec Mabtech IRIS.
IFN-γ
Description de l'analyte -
L'interféron-γ (IFN-γ) est le seul interféron de type II. Cette cytokine pro-inflammatoire est sécrétée par les cellules T et les cellules NK activées. Elle active les macrophages et les cellules endothéliales et régule les réponses immunitaires en affectant les APC, les cellules T et les cellules B. La production d'IFN-γ par les cellules T auxiliaires et les cellules T cytotoxiques est une caractéristique du phénotype de type Th1.
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