La coloration à l'acridine orange/iodure de propidium est un colorant de viabilité cellulaire qui rend les cellules nucléées viables fluorescentes en vert et les cellules nucléées non viables fluorescentes en rouge. Le colorant Acridine Orange/Propidium Iodide Stain peut être utilisé pour évaluer la viabilité des cellules avec les compteurs de cellules à fluorescence automatisés de la famille LUNA™.
L'acridine orange pénètre les cellules viables et se lie aux acides nucléiques. La liaison à l'ADN ds rend l'acridine orange fluorescente en vert et la liaison à l'ADN ss ou à l'ARN la rend fluorescente en rouge. L'iodure de propidium se lie aux acides nucléiques. Ne pouvant traverser les membranes cellulaires intactes, l'iodure de propidium est absorbé par les cellules non viables et les cellules dont les membranes sont compromises. Une fois lié aux acides nucléiques, sa fluorescence est multipliée par 20 à 30 et la cellule devient rouge. Grâce au transfert d'énergie par résonance de Förster (FRET), le signal de l'iodure de propidium absorbe le signal de l'acridine orange dans les cellules non viables, ce qui permet d'éviter les résultats doublement positifs.
Caractéristiques techniques
Perméabilité cellulaire - Perméable à la membrane (acridine orange)
Imperméable à la membrane (iodure de propidium)
Excitation/émission - 500/526nm (acridine orange)
533/617nm (iodure de propidium)
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