La methode est basée sur l’hydrolyse enzymatique des triglycérides sériques ou plasmatiques en glycérol et acides gras libres (AGL) par la lipoprotéine lipase (LPL). Le glycérol est phosphorylé par l’ adénosine triphosphate (ATP) en présence de glycerolkinase (GK) pour former le glycérol-3-phosphate (G-3-P) et l’adénosine diphosphate (ADP). Le G-3-P est oxydé par la glycérophosphate oxydase (GPO) pour former le dihydroxyacétone phosphate (DHAP) et le peroxyde d’hydrogène (eau oxygénée).
Un chromogène rouge est produit par la peroxydase (POD) catalysant la combinaison de 4-aminoantipyrine (4-AA) et du phénol en présence du peroxyde d’hydrogène (H2O2), proportionnel à la concentration de triglycérides dans l’échantillon.