La Cholinestérase (CHE) catalyse l’hydrolyse du substrat butyrylthiocholine en formant le butyrate et la thiocholine. La thiocholine est réduite par l’acide 5,5´-mercaptobis-2-nitrobenzoique (DMNB) en 5-mercapto-2-nitrobenzoate (5-MNBA), un composé coloré.
La réaction mesurée cinétiquement à 405 nm, par la formation de la coloration jaune produite, est proportionnelle à l’activité de la CHE dans l‘ échantillon.