L'ADN polymérase de Taq est une polymérase thermostable d'ADN recombiné dérivée de l'aquaticus thermophile de Thermus de bactérie. Son poids moléculaire est le kDa 94. L'ADN polymérase de Taq peut amplifier le kb jusqu'à 5 de cible d'ADN (calibre simple). La vitesse d'élongation est 2kb/min (70~75°C). Elle a 5' à 3' activité de polymérase mais manque de 3' à 5' l'activité d'exonuclease qui a comme conséquence un 3' - le DA surplombe le produit d'ACP.
Définition d'unité
Une unité est définie comme quantité de l'enzyme exigée pour catalyser l'incorporation du nmole 10 des dNTPs dans une forme non soluble dans l'acide en 30 minutes à 70°C utilisant l'ADN hering de sperme comme substrat.
Tampon de stockage
Tris-HCL de 20mM (pH 8,0), KCl de 100mM, mgcl2 de 3.2mM, 1mM DTT, 0,1% Tritons X-100, 0,1% Tween20, 0.2mg/ml BSA, glycérol de 50% (v/v).
tampond'ACP de 10× sans magnésium2+
Tris-HCL de 100mM (pH 8,8), KCl de 500mM, 1% Triton X-100.
Applications
• Amplification d'ACP des fragments d'ADN tant que kb 5
• Étiquetage d'ADN
• Ordonnancement d'ADN
• ACP pour le clonage
Concentration : 5U/μl
Contenu :
ADN polymérase de Taq - μl 100
Tampon de l'ACP 10× (magnésium2+ libre) - 1,25 ml
Tampon du chargement 6× - 1 ml
mgcl2 de 25mM - 1,25 ml
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