Réactif en solution NI™

albumine de sérum bovinde laboratoirede protéines

Protocols.io fournit une version interactive de ce protocole où vous pouvez découvrir et partager des optimisations avec la communauté des chercheurs. Un test protéique colorimétrique très sensible qui surmonte l'interférence des agents de laboratoire courants présents dans les solutions de protéines et qui présente une variation minimale d'une protéine à l'autre. L'essai n'est pas affecté par la présence d'agents de laboratoire courants, tels que les agents réducteurs, les agents chélateurs, les détergents, les amines, les sucres, les chaotropes, les sels, les médicaments, les antibiotiques, le cobalt et d'autres agents de laboratoire courants (voir les tableaux 1 et 2). Le dosage des protéines NI™ se compose de deux étapes simples : L'agent précipitant universel des protéines (UPPA™) est ajouté aux solutions de protéines pour précipiter rapidement les protéines totales. Les protéines sont immobilisées par centrifugation et les agents interférents présents dans le surnageant sont éliminés. La concentration des protéines est mesurée en les mélangeant avec une solution alcaline contenant une concentration connue de sel de cuivre ; les ions de cuivre se lient au squelette peptidique et le test mesure les ions de cuivre non liés (voir figure 2). Le test est indépendant des chaînes latérales des protéines, ce qui minimise les variations d'une protéine à l'autre (voir figure 3). La densité de la couleur est inversement proportionnelle à la quantité de protéines. Le test est fourni avec un étalon protéique traditionnel d'albumine de sérum bovin (BSA) ou un étalon protéique non animal. Caractéristiques Réponse linéaire 0,5µg-50µg de protéine Faible quantité d'échantillon nécessaire, seulement 1-50µl Non affecté par les produits chimiques et les agents non protéiques Durée du protocole : ~30 minutes Longue durée de conservation Applications Estimation des protéines lors de la purification des protéines, de l'électrophorèse, de la biologie cellulaire, de la biologie moléculaire et d'autres applications de recherche.