Protocols.io fournit une version interactive de ce protocole où vous pouvez découvrir et partager des optimisations avec la communauté des chercheurs.
Les tests protéiques sont couramment utilisés dans de nombreux domaines de recherche pour évaluer les protéines dans une vaste gamme de tampons et de conditions. Un problème majeur pour les chercheurs est de sélectionner un dosage de protéines parmi la vaste sélection sur le marché qui est compatible avec leur échantillon de protéines. Le dosage des protéines CB-X™ élimine ce problème car il est conçu pour être compatible avec tous les tampons et conditions couramment utilisés pour l'isolement, le stockage et les dosages des protéines.
Pour les échantillons de protéines dans des tampons aqueux simples et peu compliqués, CB-X™ est un dosage très sensible, à un seul réactif, qui peut être réalisé en 5 minutes. Le dosage des protéines CB-X™ utilise un colorant protéique qui constitue une amélioration du réactif de Bradford à base de colorant de Coomassie (figure 1)
Pour les échantillons de protéines compliqués, le CB-X™ Protein Assay est fourni avec des réactifs permettant de nettoyer les échantillons et d'éliminer tous les réactifs et produits chimiques qui interfèrent avec une estimation précise des protéines (figure 1). Ces réactifs comprennent des détergents, des chaotropes, des agents réducteurs, des agents alkylants, des sucres, des concentrations élevées en sel, des agents tampons et des agents chélateurs (tableau 1). L'étape de nettoyage et le dosage ultérieur des protéines sont effectués dans un seul tube afin d'éviter toute perte de protéines et de maintenir la précision du dosage. La figure 2 illustre l'effet du CB-X™ en présence de 1 % de Triton® X-100 ou de 1 % de SDS.
Si l'échantillon de protéine ne contient pas d'agents interférents, un dosage simple, à un seul réactif, est effectué pour donner une réponse linéaire.
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