Sonicateur pour biologie moléculaire Bioruptor® Plus

pour cisaillement de l'ADNpour cisaillement de l'ARN

Le Bioruptor® utilise un système unique pour traiter uniformément plusieurs échantillons dans des tubes scellés d'une capacité de 0,5 ml à 50 ml. Le système de refroidissement intégré (refroidisseur d'eau et valve à cycle unique) assure un contrôle de la température de haute précision, ce qui permet d'obtenir des échantillons de meilleure qualité. Il s'agit d'un excellent appareil pour le cisaillement de la chromatine, la désintégration des cellules et des tissus et de nombreuses autres applications (voir ci-dessous). Pour accélérer le phénotypage à grande échelle des différences de nombre de pollens au sein de la famille Arabidopsis, nous avons modifié une méthode existante plus adaptée à notre objectif de comptage du pollen à l'aide d'un Bioruptor®. Nous avons cultivé quatre plantes par génotype. Trois boutons floraux par plante ont été récoltés et séchés à 65°C pendant la nuit. Nous avons collecté des boutons floraux avec du pollen mature, mais avant que les anthères ne soient ouvertes (stade floral 13). Nous n'avons pas utilisé les premières et deuxièmes fleurs de l'inflorescence, car elles ont tendance à présenter des morphologies florales immatures sur le plan du développement. 30 μl de Tween-20 à 5 % sont ajoutés à la fleur séchée et les échantillons sont soniqués à l'aide du Bioruptor® Plus en mode haute puissance pendant 10 cycles (cycle de sonication : 30 sec ON, 30 sec OFF) pour séparer les grains de pollen des anthères. Ensuite, toutes les solutions de pollen sont mesurées à l'aide d'un compteur de cellules.