Milieu réactionnel Biosci™

pour la recherche scientifiquepour la culture cellulairede cytométrie de flux

La densité des cellules mononucléaires (lymphocytes et monocytes) dans le sang périphérique se situe entre 1,075 et 1,090 g/ml, ce qui est différent de celle des globules rouges, des leucocytes multinucléaires et des plaquettes.les densités des globules rouges et des granulocytes sont relativement élevées (environ 1,092g/ml) et la densité des plaquettes se situe entre 1,030~1,035g/ml. Par conséquent, le milieu de séparation des lymphocytes humains est utilisé pour générer un certain degré de gradient de densité, et le sang total dilué est déposé en douceur sur le milieu de séparation. Après centrifugation, les globules rouges et les granulocytes descendent au fond du tube en raison de leur forte densité ; comme leur densité est inférieure ou égale à celle du milieu de séparation, les lymphocytes et les monocytes se trouvent à la surface du milieu de séparation. Il peut également y avoir une petite quantité de cellules en suspension dans le milieu de séparation. En aspirant les cellules à la surface du milieu de séparation, les cellules mononucléaires peuvent être séparées du sang périphérique. Cette série de produits présente une série d'avantages tels qu'une utilisation rapide et simple, l'absence de cytotoxicité, un rendement cellulaire élevé et une bonne vitalité. Résolution des problèmes La température optimale de séparation est de (20±5)℃, au-delà de laquelle l'effet de séparation sera affecté. Préchauffer le milieu de séparation à la température ambiante (20±5℃) et l'agiter doucement avant utilisation. Éviter d'utiliser le milieu de séparation directement à partir du réfrigérateur. Pour le milieu de séparation, le milieu isotonique (PBS ou NaCl 0,9%) utilisé pour diluer le sang anticoagulé doit être stérile et peut être remplacé par du milieu RPMI-1640. la dilution du sang à 1:1 peut réduire la coagulation des érythrocytes et augmenter la quantité de lymphocytes prélevés.