La bibliothèque de fusion VENUS de S. cerevisiae est constituée de souches exprimant deux fragments (VN ou VC) de la protéine fluorescente VENUS attachés à l'extrémité C-terminale de chaque protéine. L'interaction entre deux protéines peut être facilement et rapidement analysée pour toutes les protéines de levure, et l'interaction entre les protéines exprimées à l'état naturel peut être analysée en utilisant son propre promoteur dans la cellule.
Caractéristiques et avantages
Analyse des interactions protéiques et de la localisation intracellulaire dans les cellules vivantes
Observation simple possible uniquement avec un microscope à fluorescence
Facilité d'étude de la fonction et de l'interaction de nouvelles protéines inconnues
Analyse de la protéinylation possible (ubiquitination, sumoylation, neddylation, etc.)
Vue d'ensemble
La bibliothèque de fusion VENUS de S. cerevisiae a été développée à l'Université nationale de Séoul (VN-fusion Library : Genome Res. 2013. 23:736-746 & VC-fusion Library : Genome Res. 2019. 29:135-145). Bioneer possède leur licence commerciale exclusive. La bibliothèque de fusion VENUS est constituée de souches de S. cerevisiae exprimant une ORF contenant chaque fragment de VENUS (VN & VC) à l'extrémité C-terminale. La protéine de fusion VN/VC a été insérée dans le chromosome de la levure par recombinaison homologue et exprimée à l'aide de son propre promoteur. La bibliothèque VN comprend 5 809 souches et la bibliothèque VC 5552 souches, couvrant plus de 90 % du protéome de S. cerevisiae. .
Principe
Essai de complémentation de fluorescence bimoléculaire (BiFC)
Dans la technique de complémentation bimoléculaire par fluorescence (BiFC), une protéine fluorescente (VENUS) est divisée en fragments N-terminal (VN) et C-terminal (VC), puis attachée à chacune des deux protéines avec lesquelles elle doit interagir et être exprimée.
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