Le kit de préparation de bibliothèque de séquençage au bisulfite (plateforme illumina) a été développé pour la construction de bibliothèques NGS utilisant de l'ADN traité au bisulfite (50 ng - 500 ng) comme intrant. La méthylation de l'ADN est un mécanisme épigénétique connu pour jouer un rôle essentiel dans la régulation des gènes et l'empreinte génomique en bloquant l'accès des facteurs de transcription aux promoteurs et aux enhancers. Le séquençage au bisulfite est une technique populaire en recherche biomédicale, basée sur la conversion de C en T sous traitement au bisulfite de sodium.
Récemment, la NGS est devenue un outil puissant pour identifier l'état de la méthylation de l'ADN au niveau du génome entier avec une résolution d'une seule base. Cependant, il est bien connu que le traitement au bisulfite des librairies NGS cause des dommages considérables aux librairies.
Dans le cas de la préparation régulière des librairies de séquences au bisulfite (préparation des librairies avant la conversion au bisulfite), il est nécessaire de disposer d'un équipement de cisaillement de l'ADN et d'adaptateurs méthylés onéreux. En outre, la conversion au bisulfite qui s'ensuit endommage considérablement l'ADN des librairies construites.
BioDynami a développé une technologie unique de préparation de bibliothèques pour résoudre ces problèmes. Cette technologie utilise de l'ADN traité au bisulfite en entrée afin d'éviter la perte importante de librairies causée par la conversion au bisulfite. De plus, l'étape de cisaillement de l'ADN et les adaptateurs méthylés coûteux ne sont pas nécessaires avec notre kit. L'ADN polymérase contenue dans le kit possède une capacité d'amplification à haute fidélité et une tolérance à l'uracile, ce qui est idéal pour l'amplification des bibliothèques de séquençage au bisulfite. La bibliothèque finale est spécifique au brin.
Avantages du kit
Protocole simple et rapide
Facile : 10 minutes de prise en main seulement
Rapide : durée totale du protocole d'environ 1,5 heure
Flux de travail simple : Moins d'étapes
Bibliothèque directionnelle
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