Ce produit est un nouveau mélange maître de PCR en temps réel à base de colorant et résistant à la contamination, développé sur la base du PanProbes™ Universal qPCR MasterMix (Cat. QPD01-0100), en ajoutant un ratio optimisé d'enzymes dUTP et UNG. Il contient des concentrations optimisées d'ADN polymérase Hotstart, de dNTP, de dUTP, d'enzyme UNG (uracil ADN glycosylase), de Mg2+, de tampon de réaction et de stabilisateur. Dans la réaction PCR, le dUTP est utilisé à la place du dTTP, et le T du fragment du produit d'amplification est remplacé par le U pour former un produit d'amplification PCR contenant des bases dU, et l'enzyme UNG hautement active peut rapidement dégrader le fragment d'ADN contenant du U dans le système de réaction, éliminant efficacement la contamination résiduelle des produits PCR dans l'environnement et réduisant considérablement les faux positifs causés par la contamination du produit d'amplification, garantissant ainsi la spécificité et la précision de l'amplification. Ce produit est un système de réaction de prémélange PCR en temps réel à 2×, à l'abri de la contamination et basé sur une sonde. Il suffit d'ajouter le modèle, les amorces, la sonde, le colorant de référence ROX (utilisé en fonction des différents instruments PCR en temps réel) et de l'eau pour obtenir une concentration de travail de 1× afin de réaliser la réaction. Il présente les avantages de la rapidité et de la simplicité, d'une grande sensibilité, d'une forte spécificité et d'une bonne stabilité, ce qui permet de minimiser l'erreur humaine, d'économiser le temps d'opération expérimentale de la PCR et de réduire la probabilité de contamination.
Test de détection de QPD02 sur différents gènes
En utilisant le QPD02 pour la transcription inverse sur des modèles d'ARN porcin dilués en série, suivie d'une qPCR, la courbe d'amplification a montré une amplification efficace et sensible de différents gènes.
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