Réactif en solution Ponceau S

solution de colorationéchelle de protéinespour western blot

La solution de coloration Ponceaus S est une coloration de membrane prête à l'emploi pour évaluer l'efficacité du transfert d'un western blot. Cette coloration est recommandée pour la coloration rapide et réversible des protéines sur les membranes de nitrocellulose ou de PVDF. La coloration au Ponceau S est réversible et peut être éliminée par une courte incubation dans du NaOH à 0,1 %. La solution de Ponceau S peut être utilisée pour évaluer la quantité totale de protéines ou l'efficacité du transfert sur les membranes de nitrocellulose et de PVDF. La membrane PVDF est colorée au Ponceau S pendant 5 minutes et lavée avec ddH2O pendant 3 minutes. Elle présente des bandes roses visibles. Voie 1, 13 : Échelle de protéines précolorées #PM019-0500 Voie 2-7 : Dilutions 2X de la séquence de protéines non colorées #PMU12-0500 Voie 8-12 : 2000, 1000, 500, 100, 50 ng de BSA Matériel nécessaire mais non fourni Récipient : boîte pour la coloration du gel Agitateur : agitateur orbital ou à bascule Préparation de la réaction Après le transfert du gel SDS-PAGE sur une membrane de nitrocellulose ou de PVDF, placer la membrane transférée dans un récipient de coloration. Immerger la membrane dans une quantité de solution de coloration des protéines Ponceau S suffisante pour couvrir toute la membrane. Agiter légèrement le récipient de coloration pendant 5 à 15 minutes à température ambiante. Les bandes de protéines seront colorées et commenceront à devenir visibles au bout de 5 à 15 minutes. Laver l'excès de coloration sur la membrane avec de l'eau distillée jusqu'à ce que les bandes de protéines soient claires. Pour l'étape suivante de blocage de la membrane, éliminer la solution de coloration Ponceau S de la membrane en plaçant la membrane dans 20 ml de NaOH à 0,1 % pendant 1 à 2 minutes, puis rincer à l'eau distillée pendant 1 à 2 minutes.