Pour la détermination quantitative des immunoglobulines IgM dans le sérum ou le plasma humain.
PRINCIPE DE LA MÉTHODE
L'IgM est un test quantitatif turbidimétrique pour la mesure de l'IgA dans le sérum ou le plasma humain. Les anticorps anti-IgM humaine, lorsqu'ils sont mélangés à des échantillons contenant des IgM, forment des complexes insolubles. Ces complexes provoquent un changement d'absorbance, dépendant de la concentration en IgM de l'échantillon du patient, qui peut être quantifié par comparaison avec un calibrateur de concentration connue en IgM.
RÉACTIFS
R1 (DILUENT) : Tampon Tris 20 mmol/L, PEG 8000, pH 8,3. Azide de sodium 0,95 g/L.
R2 ((ANTICORPS) : Sérum de chèvre, IgM anti-humain pH 7,5. Azide de sodium 0,95 g/L.
CALIBRAGE (en option)
Il est recommandé d'utiliser un calibrateur de protéines sériques.
PRÉPARATION DES RÉACTIFS
Les réactifs sont prêts à l'emploi.
INTERFERENCES
La bilirubine (20 mg/dL), l'hémoglobine (10,0 g/dL), la lipémie (5g/L) n'interfèrent pas. Le facteur rhumatoïde peut interférer à 900 UI/mL.
PROCÉDURE
Longueur d'onde : 340 nm(320-360 nm)
Température de travail : 37°C
Trajet optique : 1 cm
Type d'essai : Turbidimétrie
Direction : croissante
1. Amener les réactifs et le photomètre (porte-cuvette) à 37°C.
2. Ajuster l'instrument à zéro avec de l'eau distillée. 3. Introduire à la pipette dans un tube à essai.
4. Mélanger et lire l'absorbance (Abs.1) après l'ajout de l'échantillon ou du calibrateur.
5. Pipeter dans un tube à essai
6. Bien mélanger et lire l'absorbance (Abs.2) des calibrateurs et de l'échantillon exactement 2 minutes après l'ajout de R2.
CALCUL
Calculer la différence d'absorbance (Abs.2-Abs.1) de chaque point de la courbe d'étalonnage et reporter les valeurs obtenues en fonction de la concentration en IgM de chaque dilution de calibrateur.
---