Pour la détermination quantitative du cuivre dans le sérum ou le plasma. Pour le diagnostic in vitro uniquement.
MÉTHODOLOGIE
Le cuivre sérique est systématiquement déterminé par spectrophotométrie d'absorption atomique (SAA) ou par spectrophotométrie dans les laboratoires cliniques. La spectrophotométrie d'absorption atomique est la méthode préférée, mais ces méthodes impliquent généralement la réaction d'un filtrat exempt de protéines avec des solvants organiques ou des réactifs de déprotéinisation, et aucune n'est satisfaisante en termes de sensibilité, de rapidité et de facilité de mesure.Dans cette méthode, les composés sont solubles dans l'eau et réagissent facilement et rapidement avec les métaux en formant des complexes intensément colorés.
Principe :
Dans une solution acide (pH 4,7), le cuivre est libéré de la protéine Céruloplasmine et réduit. L'ion cuivreux réagit ensuite avec le colorant 3,5DiBr-PAESA [4-(3,5-dibromo-2-pyridylazo)-N-éthyl-N-(3-sulfopropyl) aniline] et forme un complexe coloré stable qui est mesuré par photométrie à 580 nm. L'intensité de la couleur de ce complexe est proportionnelle à la quantité de cuivre dans l'échantillon.
COMPOSITION DU RÉACTIF
Tampon d'acétate pH 4,7 ≤ 0,022 mM
3,5-DiBr-PAESA 0,2 mM
Tensioactif ≤ % 1
INTERFERENCES
Aucune interférence n'a été observée avec la bilirubine jusqu'à 15 mg/dL, l'hémoglobine jusqu'à 0,5 mg/dL et les triglycérides jusqu'à 1000 mg/dL.
MATERIAUX NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS
1. Analyseur de chimie clinique ou colorimètre capable de maintenir une température constante (37°C) et de mesurer l'absorbance à 580 nm
2. Eau déminéralisée et matériel connexe (pipettes, etc.)
3. Consommables spécifiques à l'analyseur, par exemple : coupelles d'échantillonnage et de lecture
4. Matériaux de contrôle et d'étalonnage
PROCÉDURE
Longueur d'onde : 580 nm
Température de travail : 37°C
Trajet optique : 1 cm
Type d'essai : Point final
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