Ce réactif est destiné à la détermination quantitative in vitro de la bilirubine totale dans le sérum humain.
MÉTHODOLOGIE
Cette méthode de dosage de la bilirubine totale est basée sur une modification de la méthode de Pearlmen et Lee dans laquelle un surfactant est utilisé comme solubilisant. Le nitrite de sodium est ajouté à l'acide sulfanilique pour former de l'acide sulfanilique diazoté. La bilirubine contenue dans l'échantillon réagit avec l'acide sulfanilique diazoté pour produire de l'azobilirubine qui absorbe fortement à 550 nm. L'absorbance mesurée à 550 nm est directement proportionnelle à la concentration totale de bilirubine dans l'échantillon.
RÉACTIFS
PREPARATION Tous les réactifs sont prêts à l'emploi.
DÉTÉRIORATION DES RÉACTIFS
Ne pas utiliser le réactif si :
1. Présence de particules et de turbidité.
2. Développement de la couleur dans R2.
NTERFERENCE
Liste exhaustive des médicaments et substances susceptibles d'interférer avec le dosage de la bilirubine totale. Hémoglobine : pas d'interférence jusqu'à 500 mg/dL. Lipémie : Pas d'interférence en présence de triglycérides jusqu'à 1500 mg/dL. L'acide ascorbique est une interférence.
ÉQUIPEMENT SUPPLÉMENTAIRE REQUIS MAIS NON FOURNI
1. Spectrophotomètre ou colorimètre mesurant l'absorbance à 555 (530-580) nm.
2. Eau déionisée et matériel connexe, par exemple : pipettes
3. Consommables spécifiques à l'analyseur, par exemple : coupelles à échantillons
4. Matériaux de contrôle et d'étalonnage.
Notes sur la procédure
Pour la détermination de la bilirubine chez les nouveau-nés, pipeter 10 µl d'échantillon. Multiplier le résultat par 2.
CALIBRAGE
le calibrateur de sérum ou le calibrateur de bilirubine de bt products peut être utilisé.
CONTRÔLE DE QUALITÉ
L'intégrité de la réaction doit être contrôlée par l'utilisation d'un contrôle à deux niveaux avec des valeurs de bilirubine totale connues.
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