Pour la détermination quantitative in vitro du phosphore inorganique dans le sérum.
MÉTHODOLOGIE
La mesure du phosphore inorganique dans le sérum est généralement réalisée en formant un complexe de phosphomolybdate et en le réduisant à son tour en un complexe de couleur bleu molybdène. Les méthodes diffèrent quant au choix des agents réducteurs : chlorure stanneux, phénylhydrazine, acide aminonaphtholsulfonique, acide ascorbique, pméthylaminophénolsulfate, N-phényl-p-phénylènediamine et sulfate ferreux. Ces méthodes souffraient d'une instabilité de la couleur, d'étapes de déprotéinisation et d'une complexité d'exécution. L'ajout d'un surfactant élimine la nécessité de préparer un filtrat exempt de protéines, accélère la production de couleur, stabilise la couleur et simplifie la procédure. De nombreux composants de ces réactifs étaient instables et devaient être stockés séparément. La mesure quantitative des complexes de phosphomolybdate non réduits a été rapportée pour la première fois par Simonsen en 1946. Daly et Ertingshausen ont adapté cette technique à la détermination du phosphore inorganique en 1972. Amador et Urban ont encore modifié cette procédure la même année. La présente méthode est une modification de la procédure ci-dessus utilisant un seul réactif stable fonctionnant dans la gamme des UV.
Principe
Phosphore inorganique + H2S04 + Molybdate d'ammonium Complexe de phosphomolybdate non réduit.
Le phosphore inorganique réagit avec le molybdate d'ammonium en milieu acide pour former un complexe phosphomolybdate qui absorbe la lumière à 340 nm. L'absorbance à cette longueur d'onde est directement proportionnelle à la quantité de phosphore inorganique présente dans l'échantillon.
Précautions d'emploi
1. Ce réactif est destiné uniquement au diagnostic in vitro.
---