Pour la détermination quantitative de l'UREA dans le sérum . Pour le diagnostic in vitro uniquement.
Méthodologie
Talke et Schubert ont introduit en 1965 une procédure entièrement enzymatique utilisant l'uréase et la glutamate déshydrogénase. La présente procédure est basée sur une modification de leur méthode.
Préparation des réactifs
Préparer le réactif de travail en mélangeant 4 parties de réactif 1 avec 1 partie de réactif 2 (par exemple 200 µl de R1 avec 50 µl de réactif R2)
Détérioration des réactifs
Le réactif ne doit pas être utilisé si le réactif de travail présente une absorbance à blanc inférieure à 1,0 à 340 nm.
Précautions d'emploi
1. Ce réactif est destiné uniquement au diagnostic in vitro.
2. Éviter d'ingérer le réactif car sa toxicité n'a pas encore été déterminée.
3. Les réactifs contiennent de l'azide de sodium (0,2 %) comme conservateur
Collecte et conservation des échantillons
1. Il est recommandé d'utiliser du sérum.
2. Le plasma contenant des anticoagulants ne doit pas être utilisé.
3. Tous les matériaux entrant en contact avec l'échantillon doivent être exempts d'ammoniaque et de métaux lourds. 5. Tous les échantillons de sang doivent être considérés comme potentiellement infectieux.
Matériel requis mais non fourni
1. Dispositifs de pipetage précis. (10ul et 1.0ml)
2. Minuterie. (capable de mesurer des intervalles de 30 et 60 secondes)
3. Tubes à essai
4. Spectrophotomètre avec cuvette à température contrôlée capable de mesurer à 340nm
PROCÉDURE
Longueur d'onde : 340 nm
Température : 37°C
Trajet optique : 1 cm
Type d'essai : Temps fixe
Direction de la réaction : décroissante
1. Amener à température ambiante ( 15 -30 °C)
2. Régler le photomètre sur 0 (zéro) avec de l'eau distillée.
Limites
Les échantillons dont les valeurs sont supérieures à 250 mg/dl doivent être dilués avec une solution saline à 0,9 % 1:1, dosés à nouveau et les résultats multipliés par deux.
---