Kit de réactifs d'alanine aminotransférase GPT – 11 series

en solutionde chimie cliniquede diagnostic

Pour la détermination quantitative de l'Alanine Aminotransférase dans le sérum. MÉTHODOLOGIE La Fédération internationale de chimie clinique (IFCC) a publié en 1980 une proposition de méthode recommandée utilisant l'essai couplé LDH-NADH. La procédure décrite ici est basée sur cette méthode. Principe L'ALT catalyse le transfert du groupe aminé de la L-alanine à -cétoglutarate, ce qui entraîne la formation de pyruvate et de L-glutamate. La lactate déshydrogénase catalyse la réduction du pyruvate et l'oxydation simultanée du NADH en NAD. Le taux de diminution de l'absorbance qui en résulte est directement proportionnel à l'activité de l'ALT. PRÉPARATION DES RÉACTIFS Préparer le réactif de travail en mélangeant 4 parties du réactif R1 avec 1 partie du réactif R2. (par exemple, 200 µl de R1 avec 50 µl de réactif R2) DÉTÉRIORATION DES RÉACTIFS Ne pas utiliser le réactif si : 1. L'absorbance initiale à 340 nm est inférieure à 0,8. 2. Le réactif ne répond pas aux paramètres de performance indiqués. PRÉCAUTIONS 1. Ce kit de réactifs est destiné uniquement au diagnostic in vitro. 2. Le réactif R1 contient de l'azide de sodium comme conservateur. Ne pas ingérer. COLLECTE ET CONSERVATION DES ÉCHANTILLONS 1. Il est recommandé d'utiliser du sérum non hémolysé. Les globules rouges contiennent de l'ALT qui peut donner des résultats faussement élevés. 2. L'ALT dans le sérum est stable pendant trois jours à température ambiante (15-30°C), 1 semaine à 4°C. PROCÉDURE Longueur d'onde : 340 nm Type d'essai : Cinétique Direction de la réaction : décroissante Température : 37°C Distance optique : 1 cm 1. Amener à température ambiante ( 15 -30 °C) 2. Régler le photomètre sur 0 (zéro) avec de l'eau distillée 3. Mélanger et incuber à 37 °C 4. Après 60 secondes, lire et enregistrer l'absorbance 5. Ramener le tube à 37 °C.