Cette coloration est utile pour la détection des trophozoïtes mobiles des espèces Entamoeba
ACRIDINE ORANGE (TAMPONNÉE À L'ACÉTATE)
L'ajout d'Acridine Orange à un concentré fécal met en évidence les barres chromidiennes d'Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar et Entamoeba hartmanni, qui réagissent en vert vif.
AURAMINE PHÉNOL (LEMPERT)
Méthode
1. Faire des frottis fécaux comme pour le ZN et les fixer dans du méthanol.
2. Coloration à l'Auramine-Phénol (Lemperts) pendant 10 à 15 minutes.
3. Rincer soigneusement à l'eau du robinet.
4. Décolorer à l'alcool acide (comme pour le ZN).
5. Rincer abondamment à l'eau du robinet.
6. Contre-coloration avec du permanganate de potassium à 0,1% pendant 30 secondes.
7. Rincer soigneusement à l'eau du robinet, laisser sécher à l'air libre. Ne pas sécher au buvard, de nombreuses marques de papier buvard sont fluorescentes !
Les oocystes apparaissent comme des disques jaune vif sur un fond sombre.
SOLUTION A ET SOLUTION B DE LA COLORATION DE FIELD
N.B. Les deux solutions sont prêtes à l'emploi et ne doivent pas être diluées.
Cette technique est une méthode rapide de coloration de Field, qui permet de colorer rapidement des films minces fixés de divers échantillons cliniques. Cette méthode particulière est très utile pour la coloration de films de fèces non formées, d'exsudats fécaux, d'aspirats duodénaux, etc.
Méthode
1. Réaliser un film mince de fèces/exsudat et le laisser sécher.
2. Fixez dans du méthanol pendant 1 min.
3. Inonder la lame avec 1 ml de colorant de Field B .
4. Ajouter immédiatement un volume égal de colorant de Field A, bien mélanger sur la lame et laisser colorer pendant 1 minute.
5. Rincez bien à l'eau du robinet et séchez.
6. Examinez le film en utilisant l'objectif à immersion dans l'huile et l'huile d'immersion
Résultats
Noyaux des parasites et structures contenant de la chromatine - rouge
Cytoplasme - gris bleuté
Noyaux de leucocytes - violet
Levures et bactéries - bleu foncé
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