"Molgen Genetics Haemostatic Disease (PAI-1/ITGB3) Kit" est un kit de dosage pour la détection du polymorphisme d'un seul nucléotide dans les gènes PAI-1 et ITGB3 du système de coagulation sanguine en utilisant la PCR en temps réel avec détection des courbes de fusion.
Introduction
"Le kit Molgen Genetics Haemostatic Disease (PAI-1/ITGB3) est destiné à la détection du polymorphisme d'un seul nucléotide 5G(-675)4G dans le gène PAI-1 (qui code pour la serpine 1, inhibiteur endothélial de l'activateur du plasminogène) et T1565C dans le gène ITGB3 (qui code pour l'intégrine bêta-3, une partie du récepteur du fibrinogène) dans des échantillons cliniques (sang total, épithélium buccal) en utilisant la méthode de la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel (PCR) avec analyse de la courbe de fusion.
Les résultats du génotypage sont pris en compte dans l'évaluation complexe du risque de thrombophilie (susceptibilité à la thrombophilie héréditaire).
L'extraction d'ADN à partir d'échantillons cliniques peut être réalisée à l'aide du "Molgen Universal Extraction Kit".
Ce kit est destiné à être utilisé avec le cycleur PCR de type bloc CFX96 (Bio-Rad, USA) tel que Adaltis AmpliLab.
Le kit contient les réactifs nécessaires pour 48 tests, y compris les échantillons de contrôle.
Principe de la méthode
Le principe de la méthode repose sur l'amplification de la région sélectionnée de l'ADN humain, suivie de la formation de duplex hybrides du produit PCR avec la sonde ADN spécifique et de la détection des courbes de fusion des duplex.
L'étape d'amplification consiste en des cycles répétés : dénaturation de la température de la matrice d'ADN, recuit des amorces sur des sites spécifiques de la matrice d'ADN et extension des amorces avec la Taq polymérase.
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