La trousse de réactifs MOLgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) est destinée à la détermination différentielle des polymorphismes mononucléotidiques du système de coagulation et du cycle des folates par PCR en temps réel avec détection des courbes de fusion. Les kits contiennent des réactifs pour la PCR en temps réel uniquement.
Introduction
le kit "Molgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) Kit" est destiné à la détermination différentielle des polymorphismes 20210 G/A du gène F2 (facteur de coagulation II, prothrombine) et 1691 G/A (mutation de Leiden) du gène F5 (facteur de coagulation V, proaccelerine) par réaction en chaîne de la polymérase (PCR) en temps réel, suivie de la fusion des produits d'hybridation avec une étiquette fluorescente et de la détection des courbes de fusion.
Le kit est destiné à être utilisé avec un cycleur PCR de type bloc CFX96 (Bio-Rad, USA) tel qu'Adaltis AmpliLab.
Le kit peut être utilisé dans la pratique clinique pour une étude complète des facteurs génétiques qui augmentent le risque de troubles du système de coagulation sanguine.
L'extraction d'ADN humain à partir d'échantillons cliniques (épithélium buccal, sang total) est réalisée à l'aide du kit "MOLgen Universal Extraction Kit".
Le kit est conçu pour l'analyse de 48 échantillons, y compris des échantillons de contrôle.
Principe de la méthode
Le principe de la méthode repose sur l'amplification de la région sélectionnée de l'ADN humain, suivie de la détection des courbes de fusion des complexes hybrides dans les produits PCR et les sondes spécifiques. Le processus d'amplification consiste en des cycles répétés : dénaturation de la température de la matrice d'ADN, recuit des amorces avec les séquences complémentaires de la matrice d'ADN et synthèse d'une chaîne complémentaire à partir de ces amorces à l'aide de la Taq polymérase.
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