Le kit EIAgen Total T4 est un dosage immunoenzymatique direct en phase solide pour la détermination quantitative de la thyroxine totale (T4) dans le sérum ou le plasma humain. La méthode peut être utilisée pour mesurer les concentrations de T4 dans une fourchette de 4 à 300 ng/mL (0,4 à 30 µg/dL).
Introduction
La mesure de la concentration sérique de thyroxine est généralement considérée comme un test diagnostique in vitro important pour évaluer la fonction thyroïdienne. Cette importance a été à l'origine de l'amélioration significative de la méthodologie de dosage au cours des trois dernières décennies. Cette évolution des procédures peut être retracée depuis le test empirique de l'iode lié aux protéines (PBI) (1) jusqu'au dosage radio-immunologique théoriquement sophistiqué (2).
Cette méthodologie de dosage immuno-enzymatique en microplaque offre au technicien une sensibilité optimale tout en nécessitant peu de manipulations techniques.
Principe de la méthode
L'échantillon de sérum ou de plasma est pipeté dans le puits recouvert de streptavidine. L'ajout du conjugué Biotine-T4 (Biotine-T4) et du starter de la réaction immunologique, le conjugué Anti-T4 -HRP, initie le test compétitif. Pendant l'incubation immunologique, le T4 de l'échantillon entre en compétition avec le conjugué biotine-T4 pour les sites de liaison anti-T4 du conjugué HRP anti-T4 qui, à son tour, est lié aux puits recouverts de streptavidine par la partie biotine. Après le lavage des espèces n'ayant pas réagi, la quantité de complexe immunologique restée liée aux puits
Streptavidine : Biotine-T4 : Anti-T4-HRP
est révélée par l'incubation avec le chromogène/substrat. Le développement de la couleur bleue est ensuite stoppé avec de l'acide sulfurique,
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