Digestion par enzyme de restriction
Définition de l'unité - Une unité est définie comme la quantité d'enzyme nécessaire pour digérer 1 µg de fragments d'ADN λ (digestion HindIII) en 1 heure à 37°C dans un volume total de réaction de 50 µl.
Conditions de stockage - 10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 200 μg/ml BSA, 50% Glycérol, pH 7,4 @ 25°C
Conditions de réaction - 1X Buffer CutS, Incuber à 37°C.
Tampon de réaction ou mélange - 1X Buffer CutS :
acétate de potassium 50 mM, Tris-acétate 20 mM, Acétate de magnésium 10 mM, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25°C
Inactivation par la chaleur - 65°C pendant 20 min
Sensibilité à la méthylation -
méthylation dam - Non sensible
méthylation dcm - non sensible
Méthylation des CpG - altérée
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